国产肥臀有码免费在线播放-国际精品熟女一区二区-亚洲午夜福利精品一区-在线观看亚洲黄色视频

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > NK細胞的殺傷活性檢測
NK細胞的殺傷活性檢測
更新時間:2016-01-04   點擊次數:2437次

(一)原理

   以NK細胞為例。將待測者外周血中的NK細胞與靶細胞(K562細胞)按一定比例混合培養一定時間,NK細胞作用于靶細胞,使靶細胞被殺死、破壞,進而使靶細胞線粒體內的乳酸脫氫酶釋放出來.使底物發生顏色變化,其顏色深淺與酶的釋放量成正比,檢測顯色后的光密度OD值,便可推算出NK細胞的殺傷活性。

(二)材料

1.待檢者肝素抗凝血,靶細胞為K562細胞。

2.RPMI 1640培養液、淋巴細胞分離液。

3.酶標儀、離心機。

(三)方法

1.用含5%小牛血清的RPMI 1640培養液將靶細胞調整到5×104~2×105/ml,此濃度需根據情況預先標定。

2.取待檢者肝素抗凝血3~5ml,經淋巴細胞分離液分離單個核細胞,為效應細胞。

3.在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞,每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞.只加100μl培養液。

4.向各孔加:100μl效應細胞,效應細胞與靶細胞的比例根據要求而定,通常為5:l~20:1。自然釋放孔不加效應細胞只加100μl培養液,zui大釋放孔中加100μl1%NP40。每個實驗設3個復孔。

5.置37℃5%CO2的培養箱中培養4~6h。

6.離心培養板1000r/min離心10min。每孔吸出150μl上清液.對應加入另一塊96孔酶聯檢測板中。向第二塊板每孔依次加20μl O.4mol/L乳酸溶液、20ml 4mmol/L 2一p一碘苯酯一3一p一氯化硝基苯四唑,20μl反應液[含O.03%BSA.2.7U/m1硫辛酰胺脫氫酶.4.5mmol/L氫化型輔酶I(NAD+ ),1.2%蔗糖的PBS],室溫中放置20min。

7.在酶聯檢測儀上測定各孔的光密度(OD值),檢測波長492nm,參考波長650nm;

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 日本一区不卡二区高清| 人妻av在线播放网址| 蜜臀精品国产亚洲av尤物| 精品亚洲男人天堂av| 欧美一级二级三区久久精品| 亚洲一区二区三区精品婷婷| 欧美日韩午夜激情在线| 91久久久精品人妻专区不卡| 在线观看国产日韩精品| 伊人久久大香线蕉av不卡| 久久久久久久久久久高清熟女av| 亚洲欧洲日产国码中文字幕| 91久久精品国产一区蜜臀| 日韩和欧美的一区二区成人| 久久夜精品国产噜噜亚洲av高| 天天日天天干成人网| 激情五月婷婷天天夜夜| 成人高潮片免费欲涩漫| 老色鬼久久亚洲av综合| 97国产精成人午夜视频一区二区| 国产免费一区二区三区在线网站| 99热这里只有精品三级| 精品人妻久久久中文字幕| 国产无套白浆一区二区三区四区| 亚洲av激情一区二区三区| 国产精品一区二区三区视频免费看| 97国产一区二区精品久久呦| 日韩网站免费观看高清| 日韩av免播放器在线观看| 91丝袜美女在线观看| 熟妇诱惑一区二区三区四区| 成人av网站中文字幕| 好看的中文字幕第一页| 亚洲天堂黄页在线观看| 妖精亚洲av成人精品一区二区| 92国产精品午夜福利视频| 中中文字幕av一区二区| 91成人爽片在线观看| 欧美日韩午夜激情在线| 乱码一区二区三区在线| 九月婷婷综合视频在线观看|